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色譜法應(yīng)用:
(1)分離混合物在中藥提取物的有效部位中,往往含有結(jié)構(gòu)相似、理化性質(zhì)相似的幾種成分的混合物,用一般的化學(xué)方法很難分離,可用色譜法將它們分開。
(2)精制化合物在提取、分離得到有效成分時,往往含有少量結(jié)構(gòu)類似的雜質(zhì),不易除去,也可利用色譜法除去雜質(zhì)得到純品。
(3)鑒定化合物在一定條件下,純粹的化合物在薄層色譜或紙色譜中都有一定的Rf值,在氣相色譜和高效液相色譜中有一定的保留時間,所以利用色譜法可以鑒定化合物的純度或利用標(biāo)準(zhǔn)品的對照來初步確定兩種性質(zhì)相似的化合物是否為同一物質(zhì)。
色譜條件選擇:由于中藥有效成分類型不同,性質(zhì)各異,所以選擇色譜條件是不同的。
一般生物堿的分離可用硅膠或氧化鋁柱色譜,對于極性較高的生物堿可用分配色譜,而對季銨型水溶性生物堿也可用分配色譜或離子交換色譜。
苷類的色譜分離往往決定于苷元的性質(zhì),如皂苷、強心苷,一般可用分配色譜或硅膠吸附色譜。揮發(fā)油、甾體、萜類包括萜類內(nèi)酯,往往氧化鋁及硅膠色譜。
黃酮類化合物、鞣質(zhì)等多元酚衍生物可用聚酰胺吸附色譜。有機酸、氨基酸一般可選用離子交換色譜,有時也用分配色譜。
有些氨基酸也可用活性炭吸附色譜。對于大分子化合物,如多肽、蛋白質(zhì)、多糖,常用凝膠色譜。
總的來說,對非極性成分往往考慮用氧化鋁或硅膠吸附色譜;若極性較大則采用分配色譜或弱吸附劑吸附色譜;對酸性、堿性、兩性成分可采用離子交換色譜,有時也可用吸附色譜及分配色譜等。
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